Prueba de PCR en la Cardiopatía Isquémica

Tema: 

• Nanopartículas derivadas de la válvula aórtica, sin evidencias de vida.

Objetivos:

• Clarificar si las nanopartículas calcificantes son entes vivos basándonos en si tienen o no actividad metabólica.
• Investigar el posible origen biológico de las CNP analizando los perfiles metabólicos de 1H-RMN de medios de cultivo de CNP.

Muestra:

• Nanopartículas de un cultivo de 6 válvulas aórticas.

Tipo de ácido nucleico:

• ARN bacteriano ribosomal.

Gen a amplificar:

• Gen 16S (290 pb).

Tipo de PCR:

• PCR en Tiempo Real.

Pasos de la PCR realizada: al igual que la visualización, se realiza simultáneamente con el termociclado y permite la cuantificación de amplicones. Pero de todos modos los cito:

1. Ampliación: 50°C durante 2 minutos.
2. Hibridación: 95°C durante 10 minutos.
3. Extensión: 95°C durante 1 minuto y 15 segundos.
   Todo esto, por 40 ciclos.

Visualización:

• EFO en gel de poliacrilamida con detergente aniónico dodecilsulfato sódico "PAGE - SDS".

Bibliografía:

- Barba, I. et al. Nanopartículas derivadas de la válvula aórtica, sin evidencias de vida. Rev Esp Cardiol. 2012; 65: 813 - 8.

Disponible en: http://www.revespcardiol.org/es/nanoparticulas-derivadas-valvula-aortica-sin/articulo/90150854/