Tema:
- Nanopartículas derivadas de la válvula aórtica, sin evidencias de vida.
Objetivos:
- Clarificar si las nanopartículas calcificantes son entes vivos basándonos en si tienen o no actividad metabólica.
- Investigar el posible origen biológico de las CNP analizando los perfiles metabólicos de 1H-RMN de medios de cultivo de CNP.
Muestra:
- Nanopartículas de un cultivo de 6 válvulas aórticas.
Tipo de ácido nucleico:
- ARN bacteriano ribosomal.
Gen a amplificar:
- Gen 16S (290 pb).
Tipo de PCR:
Pasos de la PCR realizada: al igual que la visualización, se realiza simultáneamente con el termociclado y permite la cuantificación de amplicones. Pero de todos modos los cito:
- Ampliación: 50°C durante 2 minutos.
- Hibridación: 95°C durante 10 minutos.
- Extensión: 95°C durante 1 minuto y 15 segundos.
Todo esto, por 40 ciclos.
Visualización:
- EFO en gel de poliacrilamida con detergente aniónico dodecilsulfato sódico "PAGE - SDS".
Bibliografía:
- Barba, I. et al. Nanopartículas derivadas de la válvula aórtica, sin evidencias de vida. Rev Esp Cardiol. 2012; 65: 813 - 8.